- 品名： 寧波新芝基因?qū)雰xSCIENTZ-2CS
- 品牌： 寧波新芝
- 型號： SCIENTZ-2CS
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品說明
SCIENTZ-2CS 基因?qū)雰x由儀器主機、基因?qū)氡皩Ｓ眠B接線等組成。主要是利用電轉(zhuǎn)化來將 DNA 轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞、動植物細(xì)胞、酵母細(xì)胞中。與其它方法相比，基因?qū)雰x法具有高重復(fù)性，高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點，同時，電轉(zhuǎn)沒有基因毒性，已經(jīng)成為不可缺少的分子生物學(xué)基本技術(shù)?！?/p>
工作原理
細(xì)胞電轉(zhuǎn)染（電轉(zhuǎn)），也叫細(xì)胞電穿孔 (electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法?！?/p>
在瞬間強大電場的作用下，溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細(xì)胞外部電流場產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細(xì)胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近，隨后細(xì)胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處?！?/p>
由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法，細(xì)胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法，電轉(zhuǎn)可以用在所有的細(xì)胞種類上，而且容易定量控制?！?/p>
細(xì)胞電轉(zhuǎn)電場圖
1 細(xì)胞膜近似絕緣體，細(xì)胞附近電轉(zhuǎn)液中電流扭曲。
2 在串聯(lián)電路中電阻越大分到電壓越大，細(xì)胞兩端電壓基本都落在兩端細(xì)胞膜上。
3 只有一個細(xì)胞端面電轉(zhuǎn)有效。
4 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到電壓很小，DNA電轉(zhuǎn)進(jìn)入細(xì)胞膜后馬上停止，后續(xù)靠細(xì)胞本身機制慢速擴散。
5 細(xì)胞核兩端電壓及其微小，微小的電壓又落在核膜上，核內(nèi)部完全沒有電壓，電轉(zhuǎn)沒有基因毒性。
產(chǎn)品特點
? 效率高 轉(zhuǎn)化時間短、轉(zhuǎn)化率高、重復(fù)性優(yōu)異
? 智能儲存 可存儲實驗參數(shù)，方便用戶調(diào)取
? 控制精準(zhǔn) 采用微處理器控制的脈沖放電
? 外形美觀 整機一體化設(shè)計，顯示直觀，操作簡單
應(yīng)用領(lǐng)域
?細(xì)菌、酵母及其他微生物的電轉(zhuǎn)化;
?哺乳動物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染、植物組織和原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)染;
?細(xì)胞雜交、融合基因?qū)?
?導(dǎo)入標(biāo)記基因起到標(biāo)記、指示的作用;
?導(dǎo)入藥物、蛋白、抗體等分子對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究;
不同菌種的轉(zhuǎn)化率
實驗舉例
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
